实验八 甲醛滴定法测定氨基氮含量PPT课件下载

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实验八实验八甲醛滴定法测定氨基氮含量甲醛滴定法测定氨基氮含量一、目的二、原理水溶液中的氨基酸为两性离子，因而不能直接用碱滴定氨基酸的羧基。用甲醛处理氨基酸,甲醛与氨基结合,可形成羟甲基衍生物，使NH3+上的H+游离出来，这样就可用碱滴定NH3+放出的H+，从而计算出氨基氮含量。掌握甲醛滴定法测定氨基氮含量的原理和方法如样品中只含有某一种已知氨基酸，由甲醛滴定的结果即可算出氨基氮的含量。如果样品是多种氨基酸的混合物（如蛋白质水解物），则滴定结果不能作为氨基酸的定量依据。甲醛滴定法常用于测定蛋白质的水解程度，随着水解程度的增加，滴定值增加，当水解完全后，滴定值保持恒定。三、操作1、取3个100mL的锥形瓶，编号。于1、2号瓶内各加入0.1mol/L的标准甘氨酸溶液2mL和水5mL，混匀。于3号瓶内加入水7mL。然后向3个瓶中各加酚酞指示剂5滴，混匀后各加中性甲醛溶液2mL，再混匀，分别用0.1mol/L标准氢氧化钠溶液滴定至溶液显微红色。重复以上实验两次，记录每次每瓶消耗标准氢氧化钠溶液的毫升数。取平均值，计算甘氨酸氨基氮的回收率。2、取未知浓度的甘氨酸溶液2mL，依上述方法进行测定，平行做3份，取平均值。计算每毫升甘氨酸溶液中含有氨基氮的毫克数。四、结果计算100%理论加入量实际测得量甘氨酸氨基氮回收率※1.4008为1mL0.1mol/L标准氢氧化钠溶液相当于氮的毫克数。1、回收率计算：公式中:实际测得量(mg)为滴定1和2号瓶耗用的标准氢氧化钠溶液毫升数的平均值与3号瓶耗用的标准氢氧化钠溶液毫升数之差乘以1.4008。理论加入量(mg)等于2乘以1.4008。24008.1)(/对未）氨基氮含量（VVmLmg公式中：为滴定待测液耗用标准氢氧化钠溶液的平均毫升数。为滴定对照液（3号瓶）耗用标准氢氧化钠溶液的平均毫升数。2、氨基氮计算：未V对V※1.4008为1mL0.1mol/L标准氢氧化钠溶液相当于氮的毫克数。试剂和器材1．试剂：（1）0.1mol/L标准甘氨酸溶液准确称取750mg甘氨酸，溶解后定容至100mL。（2）0.1mol/L标准氢氧化钠溶液（3）0.5%酚酞指示剂称0.5g酚酞溶于100mL50%乙醇。（4）中性甲醛溶液甲醛溶液（36～37％，分析纯）50mL，加入0.5％酚酞指示剂1mL，用0.1mol/L的氢氧化钠溶液滴定至微红，贮于密闭的玻璃瓶中。此试剂在临用前配制。试剂和器材1．试剂：（5）待测样品未知浓度的甘氨酸溶液。2．器材：100mL锥形瓶、25mL微量滴定管、吸量管。